Generell information

Försökets mål var att öka förståelsen för processer som styr för tidigt och normalt åldrande, med särskilt fokus på sjukdomen progeria som hos barn ger symptom som vanligen förknippas med hög ålder med påverkan på hud, ben, fett och kärlförändringar. Hos barn med progeria noteras dessutom flera sjukdomar som vanligtvis ses hos äldre personer, t.ex. hjärt- och kärlsjukdomar. Mutationer i genen LMNA har visat sig orsaka progeria. LMNA genen har också betydelse för det naturliga åldrandet hos människan.

I denna studie användes olika transgena djurmodeller med bl.a. den mutation som orsakar progeria, men även stammar som överuttrycker LaminA proteinet. LaminA är ett av de proteiner som kodas av LMNA genen och är en viktig komponent i bl.a. det strukturella stödet för cellkärnan. Kliniska/fenotypiska symptom som förväntades hos vissa stammar inkluderade tillväxthämning, låg vikt, förlust av underhudsfett, håravfall, förkortad livslängd, inflammation, bettfel, nedsatt fertilitet, benskörhet, defekt benmineralisering, benbrott, balansproblem och hjärt- och kärlsjukdomar.

Grundtillståndet inkluderade studier av uttryck av progeria-mutation i möss, där djuren skulle följas från födsel och fram till max två års ålder. Försöket klassades som måttlig svårhetsgrad. Grundtillståndet har därefter kompletterats med tre tillägg av vilka två klassats som avsevärd svårhetsgrad. Totalt inkluderade tillståndet, efter tilläggen, 15 olika åtgärder, av vilka 8 i olika kombinationer kom att användas: Biopsi för fullgod genbestämning, Induktion av uttryck av cre-recombinase, Reglering av transgent uttryck med doxycykline, Blodprov, Behandling med syntetiska oligonukleotider, Modifiering av progeria-mutationen in vivo, Icke-kirurgisk modell för vaskulär skada, Behandling med doxorubicin eller adenine samt Mätning av gripstyrka.

Uppgifter som enligt beslut av den regionala djurförsöksetiska nämnden ska beaktas/besvaras vid utvärderingen av djurförsök i efterhand.

Regionala nämnden har inte angett något att beakta vid utvärderingen.

Antal sökta djur och antal använda djur

Tillståndet medgav användning av 4000 djur (möss) av vilka 3710 användes.

Bedömning av svårhetsgrad

Den ursprungliga ansökan bedömdes som måttlig svårhetsgrad, medan två av de tre tilläggen inkluderade åtgärder som bedömdes som avsevärda. Den retrospektiva bedömningen var att 40 djur utsattes för avsevärd, 478 för måttlig, 3106 för ringa och 86 för terminal svårhetsgrad.

Två delstudier, som i tillståndet klassificerades som avsevärda utfördes:

• Modifiering av progeria-mutationen in vivo. Här användes 53 möss av vilka 15 bedömdes som avsevärd svårhetsgrad med hänvisning till fenotypen med uttryck av progeria-mutationen i hud, medan 38 kontrolldjur utan progeria-uttryck klassades som måttlig svårhetsgrad.
• Icke-kirurgisk modell för vaskulär skada med behandling med doxorubicin eller adenine. Totalt 9 djur (vildtypsmöss) fick 1 injektion av doxorubicin och avlivades efter 1-8 dagar för att studera potentiella effekter. Inget av dessa djur bedömdes ha nått avsevärd svårhetsgrad.

Utöver de ovan angivna 15 mössen, som bedömdes ha nått avsevärd svårhetsgrad klassades 25 djur av genotyp LmnaG609G/G609G som avsevärd svårhetsgrad efter uppvisande av flera kliniska uttryck för progeria.

Av de 7 djur som nådde avbrytningskriterierna var 3 progeria-möss (homozygota för progeriamutationen) som avlivats vid ca 15 veckors ålder p.g.a. viktnedgång och kutryggig hållning. De övriga 4 nådde avbrytningspunkter som inte var relaterad till fenotyp eller experiment, 2 avlivades p.g.a. ögoninfektion, 1 p.g.a. penisframfall och 1 p.g.a. sår efter slagsmål. Samtliga djur som togs ur försök p.g.a. uppnådda avbrytningskriterier klassades som måttlig svårhetsgrad. Inga djur uppnådde den förhöjda avbrytningsnivån på 1,3.

Måluppfyllelse

Försöksledaren rapporterar att målen uppfylldes och hänvisar till bl.a. ny kunskap om mutationer som påverkar åldrandet i bl.a. skelettmuskulatur. Vidare har studien visat att det är möjligt att korrigera progeriamutationen in vivo i möss med så kallad basredigering, vilket leder till en förbättrad hudfenotyp. Dessutom observerades att förmågan att korrigera mutationen försämras i takt med sjukdomsprogressionen i huden, vilket understryker vikten av tidig behandling innan symtomen blivit allvarliga. Genuttrycksmönster som kan utgöra potentiella behandlingsmål har identifierats liksom att barn med progeria uppvisar en mutation som också kan ses hos äldre personer med viss kronisk njursjukdom. Flera vetenskapliga artiklar har publicerats.

3R

Djurförsöken kompletteras med 3D-cellkulturer (organoider) och ex vivo-modeller som kan minska men inte helt ersätta djurförsöken.

Övriga kommentarer

-

Etablerad rapportstandard