Generell information

Denna studie har fokuserat på ett chaperon-protein, FKBP51 som viker och formar andra proteiner, vilket påverkar deras funktioner i kroppens celler. FKBP51 bildar ett komplex tillsammans med ett annat chaperon-protein, Hsp90, och har visats vara involverat i olika sjukdomar såsom Alzheimers, diabetes, fetma, kronisk smärta, stress, immunrelaterade sjukdomar och psykiatriska störningar.

Forskargruppen har tidigare identifierat molekyler som stör interaktionen mellan FKBP51 och Hsp90. I denna studie undersöktes om sådana FKBP51-inhiberande molekyler kunde vara intressanta som potentiella läkemedel. Dessa substanser har därför testats i sjukdomsmodeller med både vildtyps och genmodifierade möss. Bl.a. undersöktes påverkan på hjärnan och beteende, inflammation och i kombination med högfettsdiet.

Ett tilläggstillstånd inkluderade ytterligare en musmodell för Alzheimers-associerad patologi, en glukokortikoid som orsakar osteoporos och högfettsdiet med högre fetthalt och längre behandlingstid samt användning av en avbildningsteknik för bestämning av kroppssammansättning, EchoMRI.

Studien bestod av flera olika delförsök med olika svårhetsgrad, såsom:

• Avlivning för undersökning av hjärnan och andra vävnader (ringa svårhetsgrad)
• Farmakokinetiska studier där djuren fick test-substansen via vatten, mat eller en engångsinjektion, blodprov togs och hjärnan undersöktes efter avlivning. (Måttlig svårhetsgrad)
• Flera studier av måttlig svårhetsgrad utfördes, bl.a. studier där substansen undersöktes tillsammans med bl.a. glykokortikoider (en vanlig behandling vid systemisk inflammation) för att se hur det påverkade benväxt, i kombination med högfettsdieter och vid avel med olika genmodifieringar, samt i kombination med beteendestudier.
• Studier där djuren fick en högfettsdiet, injicerades med testämnet dagligen i 4 veckor, kroppsfettundersökningar gjordes via EchoMRI och flera beteendestudier såsom Open field test, Elevated plus maze, Forced swimming test och Glucose/insulin toleranstester utfördes. (Avsevärd svårhetsgrad)
• Studier där Lipopolysaccharide (LPS) injicerades, med och utan testsubstansen, kombinerat med blodprov och avlivning. (Avsevärd svårhetsgrad)
• Karaktärisering av en FKBP51-mutant mus, med beteendestudier vid 2 månaders ålder resp. 12 månader, där ett flertal tester ingick såsom Open field test, Light-dark test, Elevated plus maze, Y-maze, Novel object recognition test, Fear conditioning (med elstöt i foten), Forced swimming test, rotarod test och Acute tube restraint stress model (djuret hålls fast i ett rör följt av blodprovstagning). (Avsevärd svårhetsgrad)

Alla planerade delstudier utfördes inte. Tillstånd fanns att även använda råttor, men inga studier på råttor utfördes.

Den regionala djurförsöksetiska nämnden beslutade att utvärderingen skulle inkludera svar på flera frågor avseende försök på möss i en TNF-alphaARE/+ modell för artrit, men inga försök med denna modell utfördes.

Den djurförsöksetiska nämnden beslutade att utvärderingen även skulle inkludera ”antal/andel djur som uppnått avbrytningspunkt och anledning till avbrytande av försök för enskilda djur.” Svar: Enligt försöksledaren var det ca 10 möss, men exakta uppgifter kunde inte lämnas. Samtliga var djur i avel som inte användes i försök, bl.a. hanmöss med sårskador från bråk, fyra honor med förlossningssvårigheter där både honan och ungarna avlivades, och 1-2 musungar som föddes små och gick ner i vikt.

Antal sökta djur och antal använda djur

Den djurförsöksetiska nämndens godkännande medgav användning av 7 500 möss och 200 råttor. Totalt användes 1 600 möss, varav 612 användes i avel och inte i försök. Inga råttor användes.

Bedömning av svårhetsgrad

Av de 1 600 använda mössen bedömdes 294 ha uppnått avsevärd, 262 måttlig och 182 ringa svårhetsgrad, 57 användes i terminala försök, 193 i terminal organ-försök och 612 djur användes i avel.

Ett tiotal av avelsdjuren avlivades p.g.a. uppnådda avbrytningspunkter, medan inga djur i försök nådde avbrytningspunkter.

Måluppfyllelse

Försöksledaren rapporterar att forskningen resulterade, dels i ny kunskap om substansen som testats och dess effekter, dels karakterisering av en ny knock-in modell för FKBP51-Hsp90-interaktionsbrist. Resultaten har publicerats i flera vetenskapliga artiklar.

3R

Forskargruppen tillämpar stressfri hantering såsom t.ex. att lyfta djuren med tunnel, hantering några dagar innan tester samt habituering i 0,5-1 timme före tester i rum för beteendestudier.

Försöksledaren anger också att det i framtiden kan finnas möjligheter att ersätta denna typ av djurförsök med studier på organoider.

Övriga kommentarer

-

Etablerad rapportstandard